Mot nghien cuu sinh dem te bao trong 3 gio. AI dem cung nhung lam kinh trong 90 giay, va khong mau thuan voi chinh minh giua thu Ba va thu Sau.
Dem te bao la mot trong nhung nhiem vu lap di lap lai nhieu nhat trong sinh hoc, duoc hoc va nghien cuu y hoc. Moi thi nghiem nuoi cay te bao, nghien cuu lieu luong thuoc va xet nghiem kha nang song deu bat dau voi cung mot cau hoi: co bao nhieu te bao trong mau nay? Cau tra loi truyen thong bao gom mot hemocytometer, mot kinh hien vi va rat nhieu kien nhan. Cac cong cu dem ho tro AI gio day cung cap ket qua trong vai giay voi do nhat quan tot hon ca nhung nguoi van hanh co kinh nghiem.
Cong viec dem thu cong vat va
Dem te bao thu cong voi hemocytometer tuan theo mot quy trinh hau nhu khong thay doi trong mot the ky. Nap mau vao buong dem. Dat lam kinh che. Lay net kinh hien vi. Dem bon goc phan tu. Tinh trung binh. Nhan voi he so pha loang. Ghi lai so. Lap lai cho mau tiep theo.
Mot mau don mat 10 den 15 phut cho ky thuat vien lanh nghe. Mot ngay nuoi cay te bao dien hinh co the bao gom 10 den 30 mau, va cac thi nghiem yeu cau theo doi theo thoi gian nhan so nay len hang gio hoac hang ngay. Phep tinh tang nhanh: mot nhom nghien cuu thuc hien nhieu xet nghiem co the de dang danh 20 den 30 gio moi tuan chi de dem.
Van de lon hon khong phai la thoi gian, ma la su bien dong. Cac nghien cuu cho thay bien dong giua cac nguoi van hanh trong dem hemocytometer co the dat den 52%, va tham chi mot nguoi van hanh cung tao ra bien dong len den 20% giua cac lan dem lap lai cua cung mot mau. Loi nap buong dong gop khoang 4,6%, thao tac pipet them 4,7%, va tham chi vi tri lam kinh che cung tao ra chenh lech 7,6%. Khi cac nguon loi nay cong don, dat he so bien dong tot hon 15% doi hoi dem hang tram te bao tren nhieu buong.
Cach dem te bao bang AI hoat dong
Dem te bao bang AI bat dau voi cung mot dau vao: mot hinh anh kinh hien vi. Su khac biet nam o nhung gi xay ra tiep theo. Thay vi mot nguoi nhin chap chom vao cac goc phan tu, mot mo hinh thi giac may tinh phan doan hinh anh, nhan dien cac te bao rieng le va tra ve so dem voi cac chi thi do tin cay, thuong trong vong duoi 30 giay cho moi hinh anh.
Cac cong cu nhu SnapCyte hoat dong truc tiep voi hinh anh hemocytometer tieu chuan duoc chup o do phong dai 10X qua camera kinh hien vi hoac tham chi bo chuyen doi dien thoai thong minh. AI tu dong phat hien cac duong luoi, nhan dien te bao trong cac vung dem va tinh toan nong do va kha nang song. Ho tro cac loai buong Neubauer, Neubauer cai tien va Burker ma khong can cau hinh thu cong.
Doi voi te bao bam dinh trong dia nuoi cay, kinh hien vi tang cuong AI su dung hinh anh tuong phan pha hoac huynh quang de phat hien te bao truc tiep trong binh. Khong can xu ly trypsin, khong can chuyen mau, khong can hemocytometer. Cac te bao van o nguyen trong moi truong phat trien cua chung.
Do chinh xac va kha nang tai lap
Dem te bao bang AI dat sai so phan tram tuyet doi trung binh duoi 6,26% cho hon hop te bao song va chet, tot hon dang ke so voi pham vi bien dong 15 den 52% cua dem hemocytometer thu cong. Quan trong hon, AI cho ra cung ket qua moi lan xu ly cung mot hinh anh.
Kha nang tai lap la loi the thuc su. Trong sang loc thuoc, bien dong 20% trong so dem te bao co so lan truyen qua moi phep tinh phia sau: gia tri IC50 dich chuyen, duong cong lieu luong-dap ung dao dong va cac thi nghiem can nhieu ban sao hon de dat y nghia thong ke. Dem nhat quan ngay tu dau lam chat che moi ket qua tiep theo.
10 den 15 phut cho moi mau. He so bien dong: 5 den 15% cho nguoi dung co kinh nghiem, len den 52% giua cac nguoi van hanh. Ket qua phu thuoc vao ai dem va khi nao.
Duoi 30 giay cho moi hinh anh. Bien dong giua cac nguoi van hanh gan bang khong. Cung hinh anh, cung ket qua dem, moi lan.
Cac loai te bao hoat dong tot
Dem bang AI xu ly duoc nhieu loai te bao va che pham khac nhau.
- Te bao huyen phu (CHO, Jurkat, PBMC): phat hien don gian voi nhuom kha nang song trypan blue
- Te bao bam dinh trong nuoi cay: hinh anh tuong phan pha dem te bao ma khong can tach chung khoi dia
- Te bao mau: phan biet bach cau va dem tieu cau tu phiet nhuom
- Khuan lac vi khuan: dem CFU tren dia thach tu mot buc anh duy nhat
- Te bao nam men: phan biet nay choi va khong nay choi cho ung dung san xuat bia va cong nghe sinh hoc
Cac thach thuc chinh la cac cum te bao chong cheo nhieu, cac vung manh vu day dac va cac te bao rat nho duoi gioi han do phan giai cua vat kinh kinh hien vi. Doi voi hau het cong viec nuoi cay te bao tieu chuan o do phong dai 10X den 20X, dem bang AI da san sang cho san xuat.
Bat dau ma khong can phan cung moi
Rao can gia nhap thap hon nhung gi hau het cac nha nghien cuu mong doi. Cac cong cu dem te bao bang AI hoat dong voi cac thiet lap kinh hien vi hien co, khong can may dem tu dong chuyen dung. Mot kinh hien vi phong thi nghiem tieu chuan voi phu kien camera la du. Mot so cong cu tham chi hoat dong voi hinh anh dien thoai thong minh chup qua thi kinh.
Doi voi cac phong thi nghiem da su dung hemocytometer, qua trinh chuyen doi la ngay lap tuc: chup hinh anh ma ban thuong dem bang mat, tai len va nhan ket qua dem voi lop phu do tin cay. Hemocytometer van o do, su moi mat mat bien mat.
Ket luan
Dem te bao da la mot nut that co chai thu cong va chu quan trong cac phong thi nghiem nghien cuu hon mot the ky. AI khong thay doi sinh hoc, no thay doi thoi gian, tinh nhat quan va do tin cay cua phep dem. Duoi 30 giay thay vi 15 phut. Duoi 6% sai so thay vi 15 den 52% bien dong. Cung ket qua vao thu Ba va thu Sau.
Lan toi khi mot thi nghiem nuoi cay te bao bat dau voi 30 phut dem hemocytometer, hay thu chup anh buong dem. Ket qua se san sang truoc khi cua tu am dong lai.